蛋白质组学的应用及发展趋势3.ppt

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蛋白质组学的应用 与发展趋势 小组成员：张维旭 马国军 杨亿 主讲人 ： 马国军 （一）、蛋白质组学的应用 1 在临床疾病中的应用 2 在微生物蛋白质组学中的应用 3 在植物研究中的应用 4 在肾脏病学领域的应用 （二） 蛋白质组学的发展趋势 1 在基础研究方面 2 在应用研究方面 3 在技术发展方面 （一）、蛋白质组学的应用 1、在临床疾病中的应用 　1.诊断： 　　如疾病筛查、疾病分期分型等。因为不同病理过程中蛋白质的种类和数量会有不 同的变化，有的蛋白质呈现明显的上调，有的则较正常生理过程出现缺失或明显下调， 把这些疾病特异和疾病相关的蛋白质作为生物标志物(biomarker)。对于特定蛋白质在 特定疾病中的作用的深入研究，为最终找到疾病的病因、发病机制提供了客观依据， 也是疾病临床分期分型的分子基础。 2.指导治疗： 　　如病程分析、用药、手术时机的选择等。 　 3.提供药物开发的临床依据： 　　如确定药物靶点、新药开发(某些药物本身就是蛋白质)等。 4.预后判断： 　　如根据生物标志物在不同疾病中的变化，从而判断疾病的性质和严重程度等 在肿瘤方面的应用 恶性肿瘤的发生主要是由于相关基因发生突变，导致蛋白质的空间构成翻译后被 修饰发生改变，造成细胞周期失控，细胞凋亡机制紊乱，细胞转移能力提高等方 面的异常。 蛋白质组学可以分析、鉴定细胞同肿瘤细胞的蛋白差异，对疾病的诊断、治疗、 预后评估提供有用的信息。 在胰腺癌上的应用 胰腺癌是外科治疗效果最差的肿瘤之一，其５年生 存率不到5％，这与缺乏早期诊断的可靠办法有关。 糖链抗原19-9（CA19-9）作为胰腺癌组织分泌的黏 蛋白抗原，敏感性较高，但特异性不高，在胰腺癌 早期诊断筛查中的应用受到了限制。 在胰腺癌上的应用 现在可利用SELDI技术分析胰腺癌病人同正常人的 血清并鉴定出两个最具有识别能力的蛋白质峰，诊 断敏感度为78％，特异性为97％，高于现有的血清 标准标记物CA19-9。并且二者联用的诊断准确率更 高。 在神经系统疾病方面的应用 随着我国人口老龄化的到来，老年病尤其是老年 性神经系统疾病的发病率日趋升高，临床上主要有 阿尔茨海默症（AD）帕金森症等，临床上尚未找到 特效的治疗方法．也很难抓住良好的治疗时机。 在神经系统疾病方面的应用 应用蛋白质组学技术发现AD的脑脊液和/或血浆蛋白特异 性改变，可为AD的诊断、治疗药物的设计和筛选奠定基础。 通过分析AD病人血浆蛋白后发现，AD相关蛋白载脂蛋白E、 tau-1和早老蛋白２均可在病人血浆中检测到，提示位于细 胞器的tau-1和早老蛋白２外流到血浆中，并且达到可检测 的水平，对这些蛋白在血浆中异构体的分析将有助于脑部疾 病的诊断，而不需要损伤脑组织。 2 在微生物蛋白质组学中的应用 病毒微生物蛋白质组学 由于病毒微生物与感染性疾病密切相关，研究这些致病微生 物的蛋白质组学对于了解其毒性因子、抗原以及疫苗的制备 非常重要。 在已完成基因组测序的47种致病苏白及其菌株中，有14种已 进行过蛋白质组研究，其中对大肠埃希菌、流感嗜血杆菌、 结合分支杆菌等三种菌还进行过模式菌和临床病菌的差异蛋 白质组比较研究 遗传与变异方面的研究 遗传与变异方面的研究主要是通蛋白质研究结果 与基因组预测的（开放阅读框）ORF相比较来校正基 因组的研究结果。蛋白质组的研究结果可以对基因 组的研究结果起到补充和修正的作用，而且通过同 一致病菌不同菌株的蛋白质研究，可以对病株进行 分类。 病原菌致病机理及毒力因子的研究 通过在整体水平上比较病原菌和非致病菌的蛋白 质谱，以及在各种环境下致病菌毒力和蛋白质谱的 变化，可以发现致病株的毒力调控机制和毒力因子。 研究宿主和微生物的相互关系，寻找免疫 靶点，开发新型疫苗 蛋白质组研究方法与免疫杂交方法相结合的研究 已广泛应用于宿主对病原菌的体液和细胞免疫应答 研究中，并形成了蛋白质的一个新的分支——免疫 蛋白质组。通过细菌蛋白质组与宿主多克隆血清的 杂交反应，可以发现新的抗原决定因子群，以用于 疫苗开发和诊断分析。 药物抗性的研究 通过抗性菌株与敏感菌株的差异蛋白质组研究， 可以对细菌耐药机制进行研究，发现抗药性相关因 子，为新药研究提供线索。 抗菌药物的开发 首先是通过分析细菌对抗菌药物有不同反应的菌 株的蛋白质组可以寻找新的抗菌药物，筛选靶点和 模式。而利用一组作用位点类似的抗菌药物可以筛 选出与该类药物相应的标志物和作用模式，确定的 标志物和作用模式又可用于筛选新的候选药物或用 于确证一些新的化合物的真实作用机制和位点。 模式微生物蛋白质组学 后基因组时代典型的模式生物具有适用于各种遗传学研究方 法、传代时间短、有雄厚的研究基础的特点，可以实现对于 生物学问题的简单化研究，因而模式微生物蛋白质组研究也 是微生物蛋白质组研究的一个重要方面。 工作重点在于建立基础数据库、结构蛋白质组学、蛋白质表 达与调控、蛋白质复合物和蛋白质相互作用研究等方面。 研究最广泛的模式微生物是原核的大肠杆菌和真核的酵母菌 （包括酿酒酵母和裂殖酵母). 3 在植物研究中的应用 植物生理蛋白质组学 植物生理蛋白质组学对于更好地了解非生物胁迫的伤害机制、 植物对非生物环境的适应机制、生物之间的相互作用机制、 植物激素的调节作用等有重要意义。Renaut 等于2004 年 对欧洲山杨低温下适应反应的蛋白质研究表明, 低温诱导一 系列伴侣蛋白、应激蛋白、解毒酶和信号传导相关蛋白质含 量增加或重新合成,而细胞壁和功能相关的蛋白质减少。 植物生理蛋白质组学 Christian L 等于2005 年为了研究NO 信号分子在植物中 的调节作用, 采用蛋白质组学研究的方法对由NO 处理后的拟 南芥【Arabidopsisthaliana (Linn.) Heynh】中发生硫基亚硝 化的蛋白质进行研究发现, NO 可能是通过蛋白质的硫基亚硝 化作用来调节细胞中的应激反应、氧化还原反应、信号调节、 细胞骨架、代谢作用等相关信号途径。 植物遗传多样性蛋白质组学 植物遗传多样性蛋白质组学主要以蛋白质组学标记为纽带联 系基因多样性和表型多样性, 有助于了解植物种内和种间进 化趋势。David 等及Picard等于1997 年分别利用D-PAGE 分 析了亲缘关系很近的硬粒小麦(Triticum aestivum Linn.) 不同株系的遗传多样性, 发现品系间的多态性很低, 并且7 个蛋白可以用于基因型的鉴定。 植物遗传多样性蛋白质组学 Barreneche 等比较了6个欧洲国家的23 种栎属(Quercus Linnaeus) 植物,分析了幼苗的总蛋白质, 共得到530 种蛋白质, 其中101 个具有多 态性。 试验结果显示, 种内和种间的距离非常接近, 并且证实无梗花栎[Q. petraea(Mattuschka) Lieblein]和夏栎(Q. robur Linn.) 2 个种的遗 传分化水平很低。 植物组织器官蛋白质组学 主要研究植物根、茎、叶、种子、芽、种皮、愈伤组织等的 蛋白质组, 有助于我们了解特定组织器官、重要生理过程相 关的蛋白质功能和理解植物发育过程机制。Komat等以双向 凝胶电泳分离水稻绿叶和枯叶中蛋白质组后, 从中筛选出85 种蛋白质进行N 端Edman降解测序。对其中21 种蛋白质的N 端序列作了鉴定, 结果显示绿色叶子中有促进光合作用的蛋 白质。另外, 枯黄叶子中只发现了L-抗坏血酸盐过氧化物酶, 显示枯黄叶子中含油气保护作用的过氧化物酶。 植物组织器官蛋白质组学 Ricardo 等于2004 年对大麻(Cannabissativa Linnaeus)的 叶、花、槲果组织特异性蛋白的研究表明, 大麻醇在这些组 织中表达显著不同, 主要在槲果中分布。Hajduch 等于2005 年对大豆(Glycine max Linn.) 种子饱满期的数百种蛋白质进 行了鉴定, 其中还有许多与种子饱满相关的裂解酶、半胱氨 酸和蛋氨酸的生物合成酶、脂肪氧化酶及未知蛋白质的积累 等还在继续研究中。 植物亚细胞蛋白组学 研究一个细胞器内表达的蛋白质组。目前研究较多的是叶绿体, 对线粒体 和其他细胞器的蛋白质组学研究也有报道。分析烟草、拟南芥、水稻亚 细胞结构的质膜、线粒体膜、高尔基体膜、液泡膜等的蛋白质组, 为在基 因水平上研究植物的功能提供了有利线索。许多参与光合作用的基因也 已经用蛋白质组学技术作了鉴定, 如Lieselbach 等于2000 年分析拟南芥 叶绿体类囊体腔内蛋白质组时, 鉴定到一种新型的质体蓝素。此外, 对拟 南芥胞质核糖体、植物次生壁生长、花粉授粉的种间隔离和线粒体内分 子鉴定研究中, 也开始使用蛋白质组学技术。 4 在肾、脏病研究中的应用 4 在肾脏病学领域的应用 疾病蛋白质组学： 疾病蛋白质组学研究是利用蛋白质组学技术，通过比较正常和病 理状态下的细胞或组织中的蛋白质在表达数量、表达位置和修饰 状态上的差异，可以发现与病理改变有关或疾病特异性蛋白质。 这些蛋白质，不仅可为探索疾病发病机制提供线索，还可作为疾 病诊断的分子标记，以及作为药物开发的作用靶点。 4 在肾脏病学领域的应用 应用于肾脏疾病发病机制的研究 蛋白尿的发生机制研究 糖尿病肾病的病理机制研究 肾毒性损伤机制的研究 构成尿毒症毒素的蛋白质 应用于肾脏疾病的诊断 应用于肾脏疾病的治疗及药理研究 （二） 蛋白质组学的发展趋势 1 在基础研究方面 近两年来蛋白质组研究技术已被应用到各种生命科学 领域，如细胞生物学、神经生物学等。在研究对象上， 覆盖了原核微生物、真核微生物、植物和动物等范围， 涉及到各种重要的生物学现象，如信号转导、细胞分化、 蛋白质折叠等等。在未来的发展中，蛋白质组学的研究 领域将更加广泛。 2 在应用研究方面 蛋白质组学将成为寻找疾病分子标记和药物靶 标最有效的方法之一。在对癌症、早老性痴呆等人 类重大疾病的临床诊断和治疗方面蛋白质组技术也 有十分诱人的前景，目前国际上许多大型药物公司 正投入大量的人力和物力进行蛋白质组学方面的应 用性研究。 3 在技术发展方面 蛋白质组学的研究方法将出现多种技术并存，各 有优势和局限的特点，而难以像基因组研究一样形 成比较一致的方法。除了发展新方法外，更强调各 种方法间的整合和互补，以适应不同蛋白质的不同 特征。 3 在技术发展方面 另外，蛋白质组学与其它学科的交叉也将日益显 著和重要，这种交叉是新技术新方法的活水之源， 特别是，蛋白质组学与其它大规模科学如基因组学， 生物信息学等领域的交叉，构成组学（omics）生物 技术研究方法，所呈现出的系统生物学（System Biology）研究模式，将成为未来生命科学最令人激 动的新前沿。 THANK YOU！