涕灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、抗芽威、仲丁威和恶虫威检测方法 1．分析目标化合物 农药成分物质 分析目标化合物 涕灭威 涕灭威 乙硫甲威 乙硫甲威 杀线威 杀线威 甲萘威 甲萘威 抗芽威 抗芽威 仲丁威 仲丁威 恶虫威 恶虫威 2．仪器设备 带柱后衍生荧光检测器的高效液相色谱仪及液相色谱—质谱仪。 3．试剂 除下列试剂外，使用附录2所列试剂。 荧光发生液： 在10mg邻苯二甲醛和5μL 2－巯基乙醇中加入／L 硼酸钠溶液至100mL。 磷酸缓冲液：约800mL水中加入氢氧化钠和磷酸二氢钠，溶解后，加水至1,000mL。 4．标准品 涕灭威：含涕灭威99％以上，熔点为98℃～100℃。 乙硫甲威：含乙硫甲威99％以上，熔点为33℃～34℃。 杀线威：含杀线威99％以上，熔点为100℃～102℃。 甲萘威：含甲萘威99％以上，熔点为138℃～140℃。 抗芽威：含抗芽威99％以上，熔点为90℃～91℃。 仲丁威：含仲丁威98％以上，熔点为32℃。 恶虫威：含恶虫威99％以上，熔点为129℃～130℃。 5．试验溶液的制备 a 提取方法 ① 谷类、豆类、水果、蔬菜、种子类、末茶和啤酒花 谷类、豆类和种子类：将样品粉碎，通过420μm 标准网筛后，称取其，加入20mL水，放置2小时。 水果和蔬菜：准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量的水，搅碎混合均匀后，称取相当于样品的量。 末茶和啤酒花：称取样品。 加入200mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸，抽滤至磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，滤液合并于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约20mL。 将浓缩液转移至预先加入200mL 5％氯化钠溶液和100mL二氯甲烷(特级)的500mL分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，二氯甲烷层移入500mL三
角瓶中。水层中加入100mL二氯甲烷(特级)，按上述同样操作，合并二氯甲烷层于上述三角瓶中。加入适量的无水硫酸钠，不时振摇、混合，放置15分钟后，过滤至磨口减压浓缩器中。再用50mL二氯甲烷(特级) 洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作3次。合并洗涤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。 残留物中加入25mL正己烷和30mL正己烷饱和乙腈溶解，转移至100mL分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入200mL分液漏斗中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，重复2次，合并乙腈层于上述分液漏斗中。加入50mL乙腈饱和正己烷，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层转移至磨口减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解，准确至2mL。 ②末茶以外的茶 将样品浸泡于540mL 100℃水中，室温下放置5分钟后，过滤，移取360mL冷却的滤液于500mL三角瓶中。加入4mL饱和乙酸铅溶液，振荡、混合10秒钟后，用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸抽滤，滤液移入1,000mL分液漏斗。再用50mL丙酮洗涤上述三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物。合并洗涤液于上述分液漏斗中，加入100mL乙醚和100g氯化钠，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，将乙醚层移入300mL三角瓶。水层中加入100mL乙醚，按上述同样操作，合并乙醚层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，过滤至磨口减压浓缩器中。再用30mL乙醚洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作3次。合并洗涤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解，准确至2mL。 b 净化方法 取 a 提取方法所得的溶液，加入3mL稀盐酸，缓缓摇匀后，用孔径μm的膜滤器过滤，此为试验溶液。 6．操作方法 a 定性试验 ① 涕灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、仲丁威和恶虫威的试验 按照下列操作条件进行试验。试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。 操作条件 柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm) 柱： 内径、长150mm 不锈钢管。 柱温： 40℃ 检测器： 激发波长260nm ，发射波长445nm 流动相：A：四氢呋喃；B：水；C：甲醇。调整流速使涕灭威约12 分钟流出。 浓度梯度： 输送水：甲醇(22：3)混合溶液分钟后，浓度梯度从A：B(1：9)到(3：7)运行 分钟。再输送四氢呋喃：水(3：7)混合溶液10分钟后，输送水：甲醇(22：3)混合溶液10 分钟。 水解槽： 流动相中，注入／L 氢氧化钠溶液。保持一定的注入量。 水解槽温度： 80℃ 荧光反应槽：流动相中，注入荧光发生液。保持一定的注入量。 ② 抗芽威的试验 按照下列操作条件进行试验。用5．试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作
为试验溶液，试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。 操作条件 柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm) 柱： 内径、长250mm 不锈钢管。 检测器： 激发波长312nm ，发射波长382nm 流动相：水：甲醇：磷酸缓冲液（1：7：2）混合溶液。调整流速使抗芽威约5分钟30秒钟流出。 b 定量试验 根据与a 定性试验相同的操作条件下所得试验结果，峰高法或峰面积法定量。 c 确证试验 按照以下操作条件，进行气相色谱--质谱仪测定。用5．试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作为试验溶液，试验结果必须与标准品的一致。此外，必要时用峰高法或峰面积法进行定量。 操作条件 柱：内径，长30m石英毛细管，涂有μm厚气相色谱用5%苯基--甲基硅酮，老化。 柱温：60℃保持2分钟，此后毎分钟升温15℃。到180℃后保持3分钟。再毎分钟升温8℃，到210℃后，保持2分钟。再以毎分钟升温5℃，到225℃后，毎分钟升温25℃，到280℃后，保持5分钟。 进样器温度：250℃ 进样方式： 不分流 气体流量：用氦气作载气，调整流速使涕灭威约5分钟流出。 7．定量限 涕灭威： mg/kg； 乙硫甲威： mg/kg； 杀线威： mg/kg； 甲萘威：无记载； 抗芽威： mg/kg； 仲丁威： mg/kg； 恶虫威： mg/kg 8．注意事项 1) 带柱后衍生荧光检测器的高效液相色谱仪装置的构成通常如下图。 2) 对于柑桔类果肉等强酸性的样品同时提取抗芽威时，加入约5g碳酸氢钠可以
提高提取率。 3) 6. 操作方法中a 定性试验的浓度梯度，参考下图的曲线。 zhong 9．参考文献 无 10．类型 A
