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四国药典有关药品微生物
限度标准的比较
四国药典有关药品微生物限度标准的比较
[日期：2005-2-21] 来源：作者：胡敏[1]胡昌勤*刘文英 2 [字体：大中小]
四国药典有关药品微生物限度标准的比较
微生物限度规定的作用，是为药品生产提供壹个标准或指导，以确保药品使用的安全。各国
药典标准分为强制性的和非强制性的可达到的限度标准，这些指标正确、有效地规范了药品
生产、检定和监督的程序。
药品要能反映不引起生物降解物和没有药源性污染的微生物存于是必要的，严格控制条件致
病菌及致病菌。
壹、CP、USP、BP、JP的微生物限度要求的特点及其发展趋势
⒈各国药典收载微生物限度检查法的时间不同(见表 1)
表 1各国药典收载微生物限度检查法的时间
各国药典 CP USP BP JP
收载微生物限度
检查法的时间
1995版* 1975
（19）
1973---方法
1988---品种**
第十三改正版***
*1978年颁布第壹个药品卫生标准；1986年颁布了修改的药品卫生标准；1989年下发药品卫
生标准补充规定和说明 1995年版中国药典收载微生物限度检查法（标准仅为少数剂型）
**品种 98版 43个，其中原料药品种 38个，制剂品种仅 5个。
***仅有 6个品种。
⒉品种不断扩大
USP版本
（年代）
19（1975） 22（1990） 23（1995） 24（2000）
微生物限度品种数 35 140 150 217*
*217种包括原料药品种 72个（占 1/3）；制剂品种（占 2/3）。
⒊活菌数要求各有特点
活菌数（个/1g或 1ml） CP BP JP USP
需气菌 102~3×104 102~107 102~103 10~104
真菌 0~102 102~105 5×10~5×102 10~103
⒋控制菌的要求各有特点
CP BP JP USP
大肠杆菌 +b +b +b +a
沙门菌 +b +a +b +a
铜绿色假单胞菌 +b +b +b +a
金黄色葡萄球菌 +b +b +b +a
破伤风杆菌 +b
梭菌 +c
肠道菌及其他某些革兰阴性杆菌 +c
支原体 +
分枝杆菌 +
病毒的其他因子 +
活螨 +d
a10g或 10ml样品不得检出。
b1g或 1ml样品不得检出。
c仅为个别品种要求 10~103/1g或 1ml。
*d不列于剂型项内而以说明提出，意即不作为常规检查，如有检出，以不合格处理的依据。
二、稀释剂的种类
CP BP USP
壹般制剂 %的氯化钠溶
液
磷 酸 盐 缓
冲液
肠 溶 胶 囊
（片）
磷 酸 盐 缓
冲液
缓冲氯化钠-
蛋白胨水*
乳糖肉汤培养基**
其他合适培养基
磷酸盐缓冲液
大豆酪蛋白消化培养基**
乳糖肉汤培养基**
非水溶性的
制剂（膏剂、
油剂）
1%吐温%的
氯化钠溶液
5克吐温-20或吐温
-80
吐温-20
其他助溶剂
*缓冲氯化钠-蛋白胨水：磷酸二氢钾 ，磷酸氢二钠 ，蛋白胨（肉胨或酪胨
纯水1000ml/L。溶解之上成份，加入1~10g吐温-20或吐温-80。121℃高压蒸汽灭菌30min。
作用：可调节供试液 pH至近中性，其中蛋白胨对菌细胞有保护作用，有利于菌数及控制菌
的测定。吐温加入对含油性供试品的助溶具有作用。
**USP、BP微生物限度（污染）检查用稀释剂，除磷酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲胨水外，尚采
用之上俩种培养基，直接稀释供试品且作增菌培养.。
三、稀释剂的用量
关于供试品于稀释剂的配比，国外药典普遍规定为称（量）取供试品 10g（或 ）或 10ml
（或 ），加稀释剂使成为 100ml，和我国药典的稀释剂固定加量有所不同。
四、抑菌性供试品的判定及处理原则
对供试品抑菌性的判定，应于检查前确定。
⒈国外药典壹般方法是以加有供试液和不含供试液的检样中加入定量的已知菌（控制菌为
10~100个、菌数测定为 50~200个/ml），经培养后检查。加入的对照菌能正常检出，加有供
试液的菌落数和未加有供试液的菌落数相比较，后者不应超过前者 5倍(JP13)及 10倍
（BP1998），否则表明供试品具有抑菌性，必须采用相应的处理方法。
方法：薄膜过滤法、稀释法和中和法。
⒉我国微生物限度检查是根据不同稀释度的菌数变化和控制菌的阳性对照试验是否正常检出
来判断的。
菌数测定可根据方案规则或培养基稀释法来方案抑菌性药品的菌数，尚未提供其他方法对供
试品的抑菌性成分进行处理。
控制菌的检查，需根据供试品的不同情况，适当地进行处理，以消除抑菌成分干扰。
方法：稀释法、离心沉淀法、薄膜过滤法、中和法及树脂吸附法。
五、活菌计数的方法比较
CP BP USP JP
平皿法 a + + + +d
试管法(MPN)b + +
薄膜过滤法 c + +
a是壹种有条件的计数方法。其限制条件有三：
Ⅰ.细菌计数是以平板上生长的菌落数为基础。
Ⅱ受特定培养基和培养条件限制。
Ⅲ有繁殖能力的菌细胞才能被认定“活菌”。
bMPN适用于不完全溶解的供试品。壹般采用三级 3管制；此法所得的菌数和平板法所得的菌
数不壹定平行。
c计数的薄膜，直径要大，最好有方格便于计数。遇到抑菌药物时，冲洗次数 2~3次，冲洗
量每次约 50~100ml。
d平板涂布法：将供试液涂布于琼脂平板的表面，经培养后计数表面生长的菌落数。
六、霉菌、酵母菌菌数测定的培养基及时间
CP BP USP JP
培养基 玫瑰红钠琼脂
酵母浸出粉胨葡
萄糖琼脂
含抗生素的沙氏
葡萄糖琼脂
大豆酪蛋白消化
物琼脂
沙氏葡萄糖琼脂
大豆酪蛋白消化
物琼脂
含三种抗生素*的
沙氏葡萄糖琼脂
培养时间（天） 3 5 5~7 5
*有苄星青霉素、四环素等.
七、控制菌鉴定方法的比较
表 1大肠杆菌
CP BP USP
方法 MI法 IMViC法 IMViC法
检验量（g或 ml） 1 1 10
稀释剂 09%氯化钠溶液
磷酸盐缓冲液
乳糖肉汤
预增 2~5小时
35~37℃
增菌 胆盐乳糖增菌培养基
35~37℃18~24小时
麦康凯肉汤
43~45℃ 18~24
小时
乳糖液体培养基
30~35℃24~48小时
分离 EMB、Mac.琼脂平板
35~37℃18~24小时
麦康凯琼脂平
板
43~45℃ 18~24
小时
EMB、Mac.琼脂平板
30~35℃24~48小时
生化试验培养温度 37℃ ~℃ 37℃
生化试验判断模式 ++--或-+-- ++--或++-+ ++--或-+--
表 2铜绿假单胞菌*
CP BP USP
检验量（g或 ml） 1 1 10
稀释剂 09%氯 化 钠 溶 液
磷酸盐缓冲
液
缓冲氯化钠-
蛋白胨水
大豆酪蛋白消化培
养基
增菌 胆盐乳糖增菌培养
基
35~37℃18~24小时
大豆酪蛋白消化培
养基
35~37℃24小时
大豆酪蛋白消化培
养基
35~37℃24~48小时
分离 溴化十六烷基三甲
铵琼脂平板
35~37℃18~24小时
溴化十六烷基三甲
铵琼脂平板
35~37℃24小时
溴化十六烷基三甲
铵琼脂平板
35~37℃24~48小时
生化试验 + + +
*国外药典对某些原料药、口服制剂及外用制剂均作为特定菌控制。中国药典对外用
制剂必检。
表 3金黄色葡萄球菌
CP BP USP(JP13)
检验量（g或 ml） 1 1 10
稀释剂 09%氯化钠溶液
磷酸盐缓冲液
缓冲氯化钠 -
蛋白胨
乳糖肉汤
液体大豆酪蛋白消化
培养基
增菌 营养肉汤（或含亚碲
酸甲）培养基
35~37℃18~24小时
大豆酪蛋白消化肉汤
培养基
35~37℃24~48小时
大豆酪蛋白消化液培
养基
35℃24~48小时
分离 甘露醇氯化钠琼脂平
板、卵黄氯化钠琼脂
平板
35~37℃24~48小时
BP琼脂平板
35~37℃24~48小时
甘露醇氯化钠琼脂平
板或 BP琼脂平板或
VJ琼脂平板
35~37℃24~48小时
血浆凝固酶试验 + +* +
*对过氧化氢酶阳性球菌，可用血浆凝固酶试验和脱氧核糖核酸酶试验。
表 4沙门菌
CP BP USP
检验量（g或 ml） 1 10 10
稀释剂 09%氯化钠溶液
磷酸盐缓冲液
乳糖肉汤 乳糖液体培养基
增菌 营养肉汤培养基
35~37℃18~24小时
乳糖肉汤 乳糖液体培养基
35~37℃24~48小时
二次增菌 TTB培养基
35~37℃18~24小时
TTB培养基
42~~43℃18~24小时
SC、TTB液体培养基
35~37℃24~48小时
分离 EMB、、DHL、SS
琼脂平板
DC、XLD.琼脂平板
43~45℃24~48小时
BG、XLD、BS琼脂平
板
35~37℃18~24小时 35~37℃24~48小时
生化试验 + + +
八、结果判断及复试
CP BP USP
控制菌 壹次检出为准 壹次检出为准 不符合标准规定，取
大于 25g的样品复试
需 气 菌
和真菌
第壹次试验结果超过规定的标准，
重新抽样复试俩次，三次结果平
均方案
测定结果于规定的限
度标准 5倍以内均为
合格
同上
九、微生物限度标准的收载方式
表 1收载方式
CP BP USP
各论项下 + + +
制剂通则 + +
专论 + + +
表 2制剂通则中规定微生物限度的剂型
CP BP USP
注射剂、眼膏剂、
