叉尾 t养殖论文 AOZ在叉尾 t中的分布与除去规律
本文作者:刘永涛 1,2艾晓辉 1,2索纹纹 1,3余少梅 1,3杨秋红 1,2作者单位:1中国水产科学研究院
淡水研究中心 2中国水产科学研究院长江水产研究所 3华中农业大学水产学院
标准曲线方程与相关系数
在 1~ ~ AOZ线性关系良好,低浓度线性方程为
Y=+;高浓度线性方程为 Y=+,相关指数 r2均大于 。
方法检测限、回收率与精密度
本试验条件下,血液、肌肉、肝脏、肾脏和皮肤组织中 AOZ方法检测限均为 μg/kg。各组织中 5个
质量浓度加标水平的 AOZ平均回收率为 %~%,测得的日内精密度与日间精密度均小于
10%,分析方法满足分析要求。
AOZ在斑点叉尾血液中的浓度
将测到的 AOZ的峰面积分别与其氘代同位素内标峰面的比值代入标准曲线方程,可以求出 AOZ在斑点叉
尾血液中的浓度值(见表 3)。由表 3可以看出,AOZ峰浓度出现在 4h,浓度为(±)ng/mL,
1440h(60d)时浓度为(±)ng/mL,2160h(90d)后才检测不到 AOZ。由于 AOZ与血液中蛋白质结合
紧密,只有在强酸性条件下才能被水解下来,而鱼体血液一般成弱碱性,因此,AOZ不易被消除。
AOZ在斑点叉尾组织中分布和消除规律
AOZ在斑点叉尾肌肉中 4h达到峰浓度(±)μg/kg,1440h(60d)时浓度为
(±)μg/kg,2160h(90d)时肌肉中未检出 AOZ。AOZ在斑点叉尾皮肤中 4h达到峰浓度
(±)μg/kg,1440h(60d)时浓度为(±)μg/kg,2160h(90d)时皮肤中未检出
AOZ。AOZ在斑点叉尾肝脏中 4h达到峰浓度(±)μg/kg,1440h(60d)时浓度为
(±)μg/kg,2160h(90d)时肝脏中未检出 AOZ。斑点叉尾肾脏中 AOZ在 4h达到峰浓度为
μg/kg,1440h(60d)时浓度为 μg/kg,2160h(90d)时肾脏中未检出 AOZ(表 4)。上述结
果表明 AOZ在斑点叉尾各组织中不易消除,各组织中 AOZ至少需要 2754℃•d才能消除。数据经回归处
理得到组织中药物浓度(C)与时间(t)关系的消除曲线方程、相关指数(r2)及消除半衰期(T1/2),(见表
5)。AOZ在 4种组织中的消除半衰期 T1/2皮肤>肌肉>血液>肝脏>肾脏。图 1-图 6中每个图的 4个
离子色谱峰分别为 AOZ的母离子 m/z236,2个子离子 m/z104、m/z134的色谱峰和 AOZ-D4的子离子
m/z134的色谱峰。根据欧盟 96/23/EC[16]指令附录Ⅰ的 A组物质(包括 AOZ)的确认需要最少 4个识
别点,而 LC-MS-MS1个母离子+2个子离子的识别点数为 4,因此,采用该方法可以对 AOZ进行定性定量
分析。
呋喃唑酮原药在动物体内被迅速代谢,被代谢的主要产物为 AOZ,而 AOZ在动物体内却很难消除。欧
盟、美国、日本和我国等国家和组织均通过检测呋喃唑酮的主要代谢物 AOZ来监测呋喃唑酮的使用情
况,并规定硝基呋喃类药物的代谢物作为残留检测的标示物其最高残留限量(MRL)为 1μg/kg[17]。
徐维海等[13]报道,给罗非鱼投喂剂量为 30mg/(kg•d)的呋喃唑酮药饵 7d,实验水温为(27±2)℃,
罗非鱼肌肉中 AOZ最高浓度为(±)μg/kg,建议罗非鱼的休药期至少为 22d;谭志军等[5]报
道,在水温保持在(17±1)℃,投喂(±)g大菱鲆 15mg/kg药饵,每天投喂 2次,投喂 5d,其肌
肉中的 AOZ最高浓度为(±)μg/kg,185d时仍有(±)μg/kg;而本试验 AOZ在斑
点叉尾肌肉中的最高浓度为(±)μg/kg,60d时 AOZ仍有(±)μg/kg,90d时才未检
测到,从上述试验结果可以看出水产动物品种、规格不同,试验水温等条件都会造成 AOZ在鱼体中残留
浓度和时间存在较大差异,但总体来看 AOZ在水产动物体内残留时间较长,这与 AOZ与动物体内蛋白质
结合紧密不易被代谢和排泄的存在状态有关。
本试验在设计水产动物药物代谢及残留试验时尽量按照生产实际的用药方式和养殖方式进行,以期获得
与实际生产情况接近的数据。在本试验条件下血液、肌肉、皮肤、肝脏、肾脏中 AOZ均在停药后 4h时
达到最高浓度,1440h(60d)时血液和各组织中 AOZ均有检出浓度,分别是其判定限 1μg/kg 的
、、、和 倍。血液和各组织中 AOZ在 2160h(90d)时才未被检测到。按组织中
AOZ浓度水平由高到低排列的顺序为肾脏>肝脏>皮肤>血液>肌肉,同一时间点肾脏组织较其它组织
浓度高,这可能与肾脏组织作为 AOZ的排泄组织,并蓄积了较高浓度的 AOZ有关。消除半衰期从试验结
果来看皮肤的消除半衰期最长,其次为肌肉组织,这 2种组织的消除半衰期均长于肝脏和肾脏。主要原
因可能是 AOZ通常在体内以共价键形式与蛋白质结合紧密形成较稳定的残留,肝脏中肝微粒体可以将部
分 AOZ降解成乙醇肼[18],而肾脏可以排泄部分 AOZ,因此,其消除半衰期较皮肤和肌肉短。皮肤作
为可食组织的一部分 AOZ的浓度高于肌肉组织,而目前我国对于水产品中 AOZ的监控主要是鱼体的肌肉
组织,因此,建议相关部门将水产动物的可食组织皮肤和肌肉一起列为检测靶组织。